پاورپوینت کامل واکنش زنجیره ای پلی مراز ۷۲ اسلاید در PowerPoint

توجه : این فایل به صورت فایل power point (پاور پوینت) ارائه میگردد

 پاورپوینت کامل واکنش زنجیره ای پلی مراز ۷۲ اسلاید در PowerPoint دارای ۷۲ اسلاید می باشد و دارای تنظیمات کامل در PowerPoint می باشد و آماده ارائه یا چاپ است

شما با استفاده ازاین پاورپوینت میتوانید یک ارائه بسیارعالی و با شکوهی داشته باشید و همه حاضرین با اشتیاق به مطالب شما گوش خواهند داد.

لطفا نگران مطالب داخل پاورپوینت نباشید، مطالب داخل اسلاید ها بسیار ساده و قابل درک برای شما می باشد، ما عالی بودن این فایل رو تضمین می کنیم.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل می باشد و در فایل اصلی پاورپوینت کامل واکنش زنجیره ای پلی مراز ۷۲ اسلاید در PowerPoint،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از مطالب داخلی اسلاید ها

پاورپوینت کامل واکنش زنجیره ای پلی مراز ۷۲ اسلاید در PowerPoint

اسلاید ۴: استخراج ماده ژنتیکیاولین قدم در مهندسی ژنتیک جداسازی با خالص سازی DNA و RNA می باشد. که این کار دارای مراحلی است که عبارتند از : ۱) شکستن سلولسلول های حیوانی(شوک اسمزی- سدیم دودسیل سولفات)سلول های گیاهی (پکتیناز و سلولاز)باکتری ها با توجه با گرم مثبت یا گرم منفی ۲) رسوب دادن DNA و RNA :الکل سبب تجمع و رسوب ماده ژنتیکی می شود.۳) جدا کردن DNA وRNA :4) رسوب پروتئین ها : (استفاده از فنل و یا محلول های غلیظ نمک های مختلف)۵) جداسازی DNA و RNA از یکدیگر: (استفاده از DNase و RNase)6)رسوب ماده ژنتیکی با اتر ۷) اسپکتروفتومتری:(جهت تایید استخراج)

اسلاید ۵: PCR یا واکنش زنجیره ای پلیمراز (Polymerase Chain Reaction) تکنیکی است که با استفاده از آن می توان در مدت زمان کوتاهی قطعه خاصی از مولکول DNA را در شرایط آزمایشگاهی میلیون ها بار تکثیر نمود. این قطعه DNA ممکن است: یک ژن بخشی از یک کروموزوم یا بخش هایی از ژنوم یک موجود باشد.

اسلاید ۶: اساس این روش بسیار ساده بوده و مانند واکنش همانندسازی DNA در موجودات زنده توسط آنزیم DNA پلیمراز صورت می گیرد. در موجودات زنده، مجموعه ای از چند پروتئین و آنزیم در فرآیند همانند سازی DNA نقش دارند در حالی که در واکنش PCR تنها نوع خاصی آنزیم DNA پلیمراز مقاوم به حرارت به نام Taq polymerase به همراه بافر، کلرید منیزیم و نوکلئوتیدها جهت تکثیر قطعات DNA استفاده می شود.

اسلاید ۷: ساز و کار (برنامه) واکنش PCRاساس واکنش PCR جهت تکثیر توالی DNA دو رشته ای، تغییرات دمایی می باشد. در ابتدا پیوندهای هیدروژنی دو رشته توالی DNA با حرارت (۹۴-۹۵ درجه سلسیوس) شکسته و دو رشته از یکدیگر جدا می شوند. سپس دمای واکنش پایین آورده می شود (معمولاً ۵۰ تا ۶۰ درجه سلسیوس). در این مرحله، دو قطعه کوتاه DNA تک رشته ای (معمولاً بین ۱۸ تا ۳۰ نوکلئوتید) که دقیقاً مشابه دو طرف قطعه DNA مورد نظر برای تکثیر طراحی و ساخته شده اند (با نام پرایمر یا آغازگر)، به توالی های مکمل خود در دو رشته باز شده DNA متصل می گردند. این دو قطعه انتهای ۳’ آزاد جهت فعالیت آنزیم DNA پلیمراز را فراهم می نماید، کاری که در همانند سازی در موجودات زنده توسط آنزیم پریماز و توالی اولیه ساخته شده توسط آن انجام می گیرد. در مرحله بعد، دمای واکنش تا ۷۲ درجه سلسیوس (دمای مناسب آنزیم Taq polymerase) افزایش یافته و عمل تکثیر قطعه DNA مورد نظر بین دو پرایمر با استفاده از نوکلئوتیدهای موجود، توسط آنزیم Taq polymerase مقاوم به حرارت انجام می پذیرد.

اسلاید ۸: DNA IN THE CELLNUCLEUSMITOCHONDRION

اسلاید ۹: DNA STRUCTURE DEOXRIBO NUCLEIC ACIDDEOXYRIBOSE

اسلاید ۱۰: DNA STRUCTUREPPPPP = PHOSPHATE

اسلاید ۱۱: DNA STRUCTUREPPPPBASE=cytosine adenine thymine guanineCATGTBASEBASEBASEBASEBASE

اسلاید ۱۲: DNA STRUCTUREPPPPPPCGATTGAC

اسلاید ۱۳: POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)DNA

اسلاید ۱۴: Denature DNA by heating

اسلاید ۱۵: Primers (short pieces of DNA) bind to specific parts

اسلاید ۱۶: New DNA made by DNA polymerase + subunits of DNA

اسلاید ۱۷: New DNA made by DNA polymerase + subunits of DNA

اسلاید ۱۸: repeat cycling

اسلاید ۱۹:

اسلاید ۲۰:

اسلاید ۲۱: PCR

اسلاید ۲۲: مرحله اول: واسرشت سازی (Denaturation)، ۳۰ تا ۶۰ ثانیهعمل انجام شده در این مرحله: جدا شدن دو رشته DNAمرحله دوم: اتصال (Annealing)، ۳۰ تا ۶۰ ثانیهعمل انجام شده در این مرحله: اتصال پرایمرها به نواحی مکمل روی DNA و تعیین محدوده تکثیر قطعه DNAمرحله سوم: گسترش (Extension یا Elongation)، به ازای هر ۱۰۰۰ نوکلئوتید طول قطعه ۶۰ ثانیهعمل انجام شده در این مرحله: تکثیر قطعه DNA مورد نظراین ۳ مرحله بین ۲۵ تا ۴۰ بار تکرار می شود که به آن چرخه های PCR می گویند.

اسلاید ۲۳: heated lidsadjustable ramping timessingle/multiple blocksgradient thermocycler blocksThermocyclers

اسلاید ۲۴: اجزا واکنش PCRدر یک واکنش PCR از: نمونه DNA آنزیم Taq polymerase پرایمرها (۰.۱ – ۲.۰ M) بافریون منیزیم ( (۱ – ۵ mM نوکلئوتیدها (۲۰ –۲۵۰ M) آب نوکلئاز فری PrimersDNA templateBuffer+ +A C T GMgCl2

اسلاید ۲۵: نمونه DNA (الگو)< 0.1 ng plasmid DNA, 50 ng to 1 g gDNA for single copy genes قطعه ای از DNA محصول استخراج DNA ژنومی DNA پلاسمیدی یا حتی محصول PCR از یک واکنش دیگر

اسلاید ۲۶: معمولاً حدود یک نانوگرم از DNA پلاسمیدی یا فاژی یا یک میکروگرم از DNA ژنومی برای یک واکنش PCR کافی است. بیش از این مقدار، باعث تولید محصولات غیر اختصاصی (قطعات DNA دیگری غیر از قطعه مورد نظر)می شود .مقدار کم نمونه DNA نیز باعث کاهش دقت واکنش PCR یا عدم تکثیر قطعه مورد نظر می گردد. کیفیت نمونه DNA نیز مهم است به طوری که باقی ماندن ترکیبات مورد استفاده در مرحله استخراج DNA مثل فنل و EDTA، باعث کاهش فعالیت آنزیم Taq polymerase و عدم حصول نتیجه مورد نظر می گردد. همچنین آلوده شدن واکنش PCR با مقادیر بسیار اندک DNA از هر منبع دیگری، به دلیل حساسیت فوق العاده این تکنیک، ممکن است به تولید قطعات غیر ق