فایل ورد کامل تخلیص و مشخصات فیتاز از باسیلوس سوبتیلیس (ناتو) N–۷۷

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

این مقاله، ترجمه شده یک مقاله مرجع و معتبر انگلیسی می باشد که به صورت بسیار عالی توسط متخصصین این رشته ترجمه شده است و به صورت فایل ورد (microsoft word) ارائه می گردد

متن داخلی مقاله بسیار عالی، پر محتوا و قابل درک می باشد و شما از استفاده ی آن بسیار لذت خواهید برد. ما عالی بودن این مقاله را تضمین می کنیم

فایل ورد این مقاله بسیار خوب تایپ شده و قابل کپی و ویرایش می باشد و تنظیمات آن نیز به صورت عالی انجام شده است؛ به همراه فایل ورد این مقاله یک فایل پاور پوینت نیز به شما ارئه خواهد شد که دارای یک قالب بسیار زیبا و تنظیمات نمایشی متعدد می باشد

توجه : در صورت مشاهده بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل می باشد و در فایل اصلی فایل ورد کامل تخلیص و مشخصات فیتاز از باسیلوس سوبتیلیس (ناتو) N–۷۷،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

تعداد صفحات این فایل: ۱۴ صفحه

فیتاز خارج سلولی از Bacillus subtilis (natto) N-77 322 به میزان ۳۲۲ برابر تا مرز همگنی با فعالیت مخصوص ۸۷ واحد بر میلی گرم پروتئین با اولترافیلتراسیون و ترکیبی از کروماتوگرافی ستونی Sephadex G-100 و DEAE-Sepharose CL-6B تخلیص گردید. وزن مولکولی آنزیم تخلیص شده روی فیلتراسیون ژل به اندازه ۳۶kDa و روی الکتروفورز ژل SDS-پلی آکریل آمید به اندازه ۳۸ kDa تخمین زده شد و حاکی از آنست که آنزیم بومی یک پروتئین منومریک است. انزیم دارای نقطه ایزوالکتریک pH ی ۶۲۵ و نیاز به یون کلسیم برای تولید و فعالیت، مقدار Km برابر با ۰۵mM و انرژی فعالسازی ۹۸۷ kcal/mol برای فیتات سدیم بود. این انزیم بنا به اثبات برای فیتات نسبتا اختصاصی بود و بیشترین فعالیت را در pHی ۶ تا ۶۵ و درجه حرارت ۶۰ درجه سانتیگراد داشت. فعالیت آن تحت مهار زیاد واکنشگرها و یونهای فلزی مانند EDTA, Zn2+, Cd2+, Ba2+, Cu2+, Fe2+, AI3+ بوده است.

اسید فیتیک (میواینوزیتول ۱و۲و۳و۴و۵و۶-هگزاکیس دی هیدروژن فسفات) شکل ذخیره سازی اصلی فسفر در غلات و حبوبات است که از ۱۸ تا ۸۸ درصد کل فسفر را نشان می دهد. شکل فیتات فسفر به راحتی قابل استفاده توسط حیوانات تک معدی نیست و در نتیجه منجر به مشکلات آلودگی فسفری در مناطق پرتراکم تولید دام می شود. واکنش اسید فیتیک با مواد معدنی رژیم غذایی ضروری، پروتئین یا ویتامین ها یکی از عوامل اصلی محدودکننده ارزش غذایی غلات و حبوبات در انسان و حیوانات است. تلاش هایی برای هیدرولیز کردن فیتات غذایی توسط فیتازها برای بهبود کیفیت خوراک دام و کاهش میزان فسفر دفع شده توسط حیوانات انجام شده است. محلولهای فیتاز میکروبی نسبتا تخلیص شده در Aerobacter aerogenes، Pseudomonas sp.، Aspergillus niger و Aspergillus oryzae گزارش شده است . با اینحالف مشخصات محلولهای آنزیم همگن تنها در چند میکروارگانیسم مانند Aspergillus terreus، Aspergillus ficuum وBacillus subtilis روشن شده است.
سوشهای B. subtilis (Natto) به خوبی روی لوبیای سویای بخارپز رشد کرده اند که غنی از فیتات هستند و بدون هیچ گونه تغذیه اضافی رشد می کنند و به طور فعال می تواند آنها را به نانو تخمیر کند که یک پنیر لوبیای سویای سنتی در ژاپن می باشد. از اینرو سعی کردم تحقیق کنم که آیا سوشهای B. subtilis (Natto) تولید انزیم های هیدرولیتیکی احتمالی برای فیتات در لوبیای سویا می کند یا خیر و دریافتم که اکثر جدایه های B. subtilis (Natto) از نمونه های بازاری natto فعالانه فیتاز تولید کردند.
در این مقاله، تخلیص و مشخصات فیتاز B. subtilis (Natto) در رابطه با سایر فیتازهای میکروبی توضیح داده می شود.

عنوان انگلیسی:Purification and Characterization of Phytase from Bacillus suhtilis (natto) N–۷۷~~en~~

An extracellular phytase from Bacillus subtilis (natto) N-77 was purified 322-fold to homogeneity with the specific activity of 8.7 units per mg protein by ultrafiltration, and a combination of Sephadex G-IOO and DEAE-Sepharose CL-6B column chromatographies. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 36 kDa on gel filtration and 38 kDa on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, suggesting that the native enzyme is a monomeric protein. The enzyme had the isoelectric point of pH 6.25, and Ca2 + requirement for the production and activity, the Km value of 0.5 mM, and the activation energy of 9.87 kcal/mol for sodium phytate. The enzyme proved to be fairly specific for phytate and was most active at pH 6.0-6.5 and 60°C. Its activity was greatly inhibited by reagents and metal ions such as EDT A, Zn2 +, Cd2 +, Ba2 +, Cu2 +, Fe2 +, and AI3 +.

Phytic acid (myo-inositol 1,2,3,4,5,6·hexakis dihydrogen phosphate) is the major storage form of phosphorus in cereals and legumes, representing 18 to 88% of the total phosphorus. I) Phytate form of phosphorus is not readily utilizable by monogastric animals2 ) and results in contribution to phosphorus pollution problems in areas of intensive livestock production. The interaction of phytic acid with essential dietary minerals, protein, or vitamins is considered to be one of the primary factors limiting the nutritional values of cereals and legumes in man and animals. 3 ) Attempts4 – 7) have been made to hydrolyze dietary phytate by phytases to improve the feed quality and to decrease in the amount of phosphorus excreted by animals. Partially purified microbial phytase preparations have been reported in Aerobacter aerogenes,8) Pseudomonas Sp.,9) Aspergillus niger, 10) and Aspergillus oryzae. ll ) However, characteristics of homogeneous enzyme preparations have been elucidated only in a few microorganisms such as Aspergillus terreus,12,13) Aspergillus ficuum, 14) and Bacillus subtilis. 15 )

Bacillus subtilis (natto) strains’ grow well on steamed soybeans, which are rich in phytate, without any additional nutrition, and can actively ferment those to natto, a traditional soybean cheese in Japan. Therefore, I attempted to survey whether B. subtilis (natto) strains produce potential hydrolytic enzymes for phytate in soybeans, and have found that most of the B. subtilis (natto) isolates from commercial natto samples actively produced phytase. This paper describes purification and characterization of B. subtilis (natto) phytase in relation to other microbial phytases.

$$en!!