فایل ورد کامل القای دودمانی چند قوه زا از جنین و فیبروبلاست موش بالغ توسط عوامل تعریف شده

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

این مقاله، ترجمه شده یک مقاله مرجع و معتبر انگلیسی می باشد که به صورت بسیار عالی توسط متخصصین این رشته ترجمه شده است و به صورت فایل ورد (microsoft word) ارائه می گردد

متن داخلی مقاله بسیار عالی، پر محتوا و قابل درک می باشد و شما از استفاده ی آن بسیار لذت خواهید برد. ما عالی بودن این مقاله را تضمین می کنیم

فایل ورد این مقاله بسیار خوب تایپ شده و قابل کپی و ویرایش می باشد و تنظیمات آن نیز به صورت عالی انجام شده است؛ به همراه فایل ورد این مقاله یک فایل پاور پوینت نیز به شما ارئه خواهد شد که دارای یک قالب بسیار زیبا و تنظیمات نمایشی متعدد می باشد

توجه : در صورت مشاهده بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل می باشد و در فایل اصلی فایل ورد کامل القای دودمانی چند قوه زا از جنین و فیبروبلاست موش بالغ توسط عوامل تعریف شده،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

تعداد صفحات این فایل: ۳۴ صفحه

خلاصه

سلول های تمایز یافته را می توان با انتقال محتویات هسته ای به تخمک ها یا از طریق ادغام با سلول های بنیادی جنینی (ES)، به یک حالت مشابه جنینی ، دوباره برنامه ریزی کرد( کاری کرد که سلول های تمایز یافته مجددا به حالتی مشابه حالت جنینی برگردند). در مورد عواملی که در این پروسه (برنامه ریزی دوباره) دخیل هستند،اطلاعات کمی موجود است. در اینجا، القاء سلول های بنیادی پرتوان را از فیبروبلاست های جنینی یا بالغ موش را با اضافه کردن چهار عامل Oct3 / 4، Sox2، c-Myc و Klf4 تحت شرایط کشت سلولی ES نشان می دهیم. به طور غیرمنتظره Nanog قابل چشم پوشی بود. این سلول ها که ما آنها را IPS (سلول های بنیادی پرتوان القا شده) نامیدیم، ویژگی های مورفولوژی و رشد سلول های ES را نشان می دهند و ژن های نشانگر سلولی ES را بیان می کنند. پیوند زیر جلدی سلول های iPS به موش های برهنه منجر به ایجاد تومورهای حاوی انواع بافت از هر سه لایه زایشی می شود. سلول های iPS پس از تزریق به بلاستوسیست ها به رشد جنین موش کمک کردند. این داده ها نشان می دهد که سلول های بنیادی پرتوان می توانند به طور مستقیم از کشت فیبروبلاست ها از طریق افزودن تنها چند عامل تعریف شده تولید شوند.

تمایز درون سلولی سلول های iPS

سلول ها توسط تریپسیناسیون برداشت شده و به داخل ظرف محیط کشت باکتریایی ES بدون G418 یا LIF انتقال داده شدند. بعد از ۳ روز، سلولهای جمع شده روی ظروف کشت بافت کوت شده با ژلاتین قرار داده شدند و ۳ روز دیگر انکوبه شدند. این سلولها با آنتی بادی مونوکلونال ضد آکتین عضلانی صاف (N1584، Dako)، آنتی بادی پلی کلونال ضد afetoprotein (N1501، Dako) یا آنتی بادی مونوکلونال ضد bIII tubulin (CBL412، Abcam) همراه با ۴۰-۶-diamidino- 2-phenylindole ( (Sigma رنگ آمیزی شدند. RNA کامل استخراج شده از بدن های جنینی در پلیت در روز ۶ برای آنالیز RT-PCR مورد استفاده قرار گرفت.

عنوان انگلیسی:Induction of Pluripotent Stem Cells from Mouse Embryonic and Adult Fibroblast Cultures by Defined Factors~~en~~

SUMMARY

Differentiated cells can be reprogrammed to an embryonic-like state by transfer of nuclear contents into oocytes or by fusion with embryonic stem (ES) cells. Little is known about factors that induce this reprogramming. Here, we demonstrate induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic or adult fibroblasts by introducing four factors, Oct3/4, Sox2, c-Myc, and Klf4, under ES cell culture conditions. Unexpectedly, Nanog was dispensable. These cells, which we designated iPS (induced pluripotent stem) cells, exhibit the morphology and growth properties of ES cells and express ES cell marker genes. Subcutaneous transplantation of iPS cells into nude mice resulted in tumors containing a variety of tissues from all three germ layers. Following injection into blastocysts, iPS cells contributed to mouse embryonic development. These data demonstrate that pluripotent stem cells can be directly generated from fibroblast cultures by the addition of only a few defined factors.

In Vitro Differentiation of iPS Cells

Cells were harvested by trypsinization and transferred to bacterial culture dishes in the ES medium without G418 or LIF. After 3 days, aggregated cells were plated onto gelatin-coated tissue culture dishes and incubated for another 3 days. The cells were stained with antia-smooth muscle actin monoclonal antibody (N1584, Dako), anti-afetoprotein polyclonal antibody (N1501, Dako) or anti-bIII tubulin monoclonal antibody (CBL412, Abcam) along with 40 -6-diamidino2-phenylindole (Sigma). Total RNA derived from plated embryoid bodies on day 6 was used for RT-PCR analysis.

$$en!!