فایل ورد کامل زمان بندی همه چیز است: تنظیم صلاحیت تکوینی در طول اندام زایی اندودرم با علامت دهی مجدد Wnt، BMP و RA

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

این مقاله، ترجمه شده یک مقاله مرجع و معتبر انگلیسی می باشد که به صورت بسیار عالی توسط متخصصین این رشته ترجمه شده است و به صورت فایل ورد (microsoft word) ارائه می گردد

متن داخلی مقاله بسیار عالی، پر محتوا و قابل درک می باشد و شما از استفاده ی آن بسیار لذت خواهید برد. ما عالی بودن این مقاله را تضمین می کنیم

فایل ورد این مقاله بسیار خوب تایپ شده و قابل کپی و ویرایش می باشد و تنظیمات آن نیز به صورت عالی انجام شده است؛ به همراه فایل ورد این مقاله یک فایل پاور پوینت نیز به شما ارئه خواهد شد که دارای یک قالب بسیار زیبا و تنظیمات نمایشی متعدد می باشد

توجه : در صورت مشاهده بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل می باشد و در فایل اصلی فایل ورد کامل زمان بندی همه چیز است: تنظیم صلاحیت تکوینی در طول اندام زایی اندودرم با علامت دهی مجدد Wnt، BMP و RA،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

تعداد صفحات این فایل: ۳۳ صفحه

روش های مخصوص hPSC

رده‌ی سلول‌های بنیادی جنینی انسانی WA01 (H1؛ WiCell) در شرایط فقدان تغذیه‌کننده بر روی ماتریژل (شرکت علوم زیستی BD) در محیط کشت mTesR1 (فن‌اوری سلول‌های بنیادی) کشت داده شد. القاء DE در روز سوم بصورت زیر انجام شد: hESCها در سوسپانسیون تک سلولی با استفاده از accutase حل شدند و در یک پلیت خانه در محیط کشت mTesR1 با ROCK inhibitor Y-27632 کشت شدند ( میکرومول). در روز بعدی، سلول‌ها در معرض محیط کشت القا کننده‌ی روز اول قرار گرفتند: RPMI 1640 (ترموفیشر ) + آمینواسیدهای غیرضروری × (NEAA؛ ترموفیشر ) + نانوگرم/میلی‌لیتر Wnt3a (شرکت‌ R&D، -WN) + 10 نانوگرم/میلی‌لیتر BMP4 (R&D، -BP) + 100 نانوگرم/میلی‌لیتر اکتیوین A (R&D، -AC). محیط کشت القا DE روز دوم از RPMI 1640 + سرم جنین گاو مشخص (dFBS؛ گیبکو ) + NEAA × + نانوگرم/میلی‌لیتر اکتیوین A تشکیل شد. محیط کشت القاء DE روز سوم شامل RPMI 1640 + dFBS 2% + NEAA × بود و حاوی غلظت‌هایی از مولکول‌های کوچک یا پروتئین‌های زیر بود: Noggin انسانی نانوگرم/میلی‌لیتر (R&D، -NG)، CHIR99021 uM2 (توکریس )، یا uM2 ترانس رتینوئیک اسید (سیگما R2625). برای ساعت آخر کشت، اندودرم دارای الگو در معرض محیط کشت RPMI 1640 + dFBS 2% + NEAA × + CHIR99021 uM3 + BMP4 50 نانوگرم/میلی‌لیتر.

عنوان انگلیسی:Timing is everything: Reiterative Wnt, BMP and RA signaling regulate developmental competence during endoderm organogenesis~~en~~

hPSC methods Human

ESC line WA01 (H1; WiCell) was maintained in feeder-free conditions on Matrigel (BD Biosciences) in mTesR1 media (Stem Cell Technologies). 3-day induction of DE was performed as briefly follows: hESCs were dissociated into single cell suspension using accutase and plated into a 24-well plates in mTesR1 with ROCK inhibitor Y-27632 (10 M; Stemgent 04–). On the following day, cells were exposed to Day1 DE induction media: RPMI 1640 (ThermoFisher 61870036) + 1X non-essential amino acids (NEAA; ThermoFisher 11140050) + 25 ng/mL Wnt3a (R & D systems 5036-WN) + 10 ng/mL BMP4 (R & D 314-BP) + 100 ng/mL Activin A (R & D 338-AC). Day 2 DE induction media consisted of RPMI 1640 + 0.2% defined fetal bovine serum (dFBS; Gibco 16141079) + 1X NEAA + 100 ng/mL Activin A. Day 3 DE induction media consisted of RPMI 1640 + 2% dFBS +100 ng/mL Activin A. DE was then exposed to various patterning conditions over the next 72 h, all of which used RPMI 1640 media + 2% dFBS +1X NEAA containing the following small molecules or protein concentrations: 200 ng/mL human Noggin (R & D 6057-NG), 2uM CHIR99021 (TOCRIS 4423), or 2uM all trans retinoic acid (Sigma R2625). For the last 72 h of the culture, patterned endoderm was exposed to RPMI 1640 media + 2% dFBS +1X NEAA + 3uM CHIR99021 + 50 ng/mL BMP4.

$$en!!